產(chǎn)品描述 

       螢火蟲熒光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin，在Luciferin 氧化的過程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(Bioluminescence)。海腎熒光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide，在Coelenterazine 氧化的過程中也會(huì)發(fā)出生物熒光。生物熒光可以通過化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測定儀進(jìn)行測定。
在 DLR 檢測中，螢火蟲（Firefly）熒光素酶和海腎（Renilla）熒光素酶的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測。先是先以熒光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)，后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎熒光素酶(Renilla Luciferase)，并在后續(xù)加入海腎熒光素酶底物時(shí)，同時(shí)加入抑制螢火蟲熒光素酶催化Luciferin發(fā)光的物質(zhì)，使后續(xù)檢測僅僅檢測到海腎熒光素酶的活性，實(shí)現(xiàn)雙熒光素酶報(bào)告基因檢測。通過熒光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5' 啟動(dòng)子區(qū)克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 區(qū)克隆在Luciferase 的下游等，構(gòu)建成報(bào)告基因(Reporter Gene)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。 Renilla Luciferase 相對更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。
Firefly & Renilla雙熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。
訂購信息

試劑盒組分

保存方法
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期12個(gè)月。
【注】：C組分建議預(yù)先使用B組分配制為2 mg/mL儲(chǔ)液，B組分、D組分及配制為儲(chǔ)液的C組分，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行小批量分裝。所有檢測工作液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
 1. 為取得最佳測定效果，在用單管的化學(xué)發(fā)光儀測定時(shí)，樣品和測定試劑混合后到測定前的時(shí)間應(yīng)盡量控制一致；使用具有化學(xué)發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標(biāo)儀時(shí)，宜先把樣品全部加好，然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑。
 2. 由于溫度對酶反應(yīng)有影響，所以測定時(shí)樣品和試劑均需達(dá)到室溫后再進(jìn)行測定
 3. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。